離子色譜是高效液相色譜的一種,故又稱高效離子色譜( HPIC)或現(xiàn)代離子色譜。離子色譜法利用混合物中組分離子在流動(dòng)相和固定相間分配系數(shù)的差別,當(dāng)離子在兩相間做相對(duì)移動(dòng)時(shí),各離子在兩相間進(jìn)行多次分配從而使各組分離子得到分離,其過(guò)程的本質(zhì)是待分離混合離子在固定相和流動(dòng)相之間分配平衡的過(guò)程。然后用電導(dǎo)或紫外檢測(cè)器對(duì)分離出來(lái)的離子進(jìn)行定性檢測(cè),再結(jié)合色譜進(jìn)行定量分析。
離子色譜儀主要由流動(dòng)相傳送部分、分離柱、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理四大部分組成,分離原理也是通過(guò)流動(dòng)相和固定相之間的相互作用,使流動(dòng)相中的不同組份在兩相中重新分配。由于各組份在分離柱中的滯留時(shí)間有所區(qū)別,從而達(dá)到分離的目的。在將分離后的各個(gè)成分依次通過(guò)一高靈敏度的檢測(cè)器時(shí)就可檢測(cè)出各離子成分的濃度來(lái),它具有高效、快速、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。
離子色譜儀的工作原理是輸液泵將流動(dòng)相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送至分析體系,在色譜柱之前通過(guò)進(jìn)樣器將樣品導(dǎo)入,流動(dòng)相將樣品帶入色譜柱,在色譜柱中各組分被分離,并依次隨流動(dòng)相流至檢測(cè)器,抑制型離子色譜則在電導(dǎo)檢測(cè)器之前增加一個(gè)抑制系統(tǒng),即用另一個(gè)高壓輸液泵將再生液輸送到抑制器,在抑制器中,流動(dòng)相的背景電導(dǎo)被降低,然后將流出物導(dǎo)入電導(dǎo)檢測(cè)池,檢測(cè)到的信號(hào)送至數(shù)據(jù)系統(tǒng)記錄、處理或保存。
離子色譜儀壓力指示異常的原因:
1、恒流泵單向閥污染。如果淋洗液或水中有少量的固體雜質(zhì),有可能污染單向閥。單向閥污染后會(huì)產(chǎn)生壓力不穩(wěn)定,甚至壓力為0的現(xiàn)象。解決的方法是更換單向閥或?qū)蜗蜷y取下后清洗后再裝上。
2、六通進(jìn)樣閥堵塞。在開(kāi)泵狀態(tài)下卸開(kāi)每一個(gè)孔路,觀察流液情況進(jìn)行確定和相應(yīng)的沖洗處理。
3、色譜柱入口處濾膜堵塞。將色譜柱取下并擰下柱頭,小心取出其中的濾膜,放人1:1的硝酸中浸泡,超聲波清洗30min后,用去離子水沖洗后裝上;或?qū)⑸V柱反接后沖洗。此方法建議專業(yè)的人來(lái)完成,使用者不要輕易使用。
4、抑制器或電導(dǎo)池流路系統(tǒng)處有地方卡死。方法檢查色譜柱后面部分,觀察每個(gè)接頭的地方是不是有被卡死的現(xiàn)象,并做想應(yīng)的疏通處理。接頭不要卡的太緊了。
離子色譜儀的使用方法:
(1)打開(kāi)鋼瓶氣源開(kāi)關(guān),分壓表調(diào)到0.2-0.3(建議不關(guān)閉鋼瓶氣源);
?。?)調(diào)節(jié)減壓閥到3-6Psi左右;
?。?)依次打開(kāi)SP泵、EG淋洗液自動(dòng)發(fā)生器、DC色譜單元、AS自動(dòng)進(jìn)樣器和VWD紫外檢測(cè)器的電源開(kāi)關(guān)。
?。?)如儀器長(zhǎng)時(shí)間不使用或更換淋洗液后,要先打開(kāi)平衡泵頭上的PRIME閥排氣。
(5)打開(kāi)電腦,待右下角變色龍服務(wù)器圖標(biāo)變灰色后,雙擊桌面的變色龍,打開(kāi)控制面板。
(6)開(kāi)泵,根據(jù)連接的柱子設(shè)定泵流速(氨基酸0.22;糖PA10:1;糖PA200:0.4;陰離子1或1.2;氫氧化鉀濃度30mM;陽(yáng)離子CS18:0.25);設(shè)定柱箱溫度(30度);電導(dǎo)檢測(cè)器:根據(jù)具體的試驗(yàn)條件,在控制面板DC頁(yè)面選定抑制器類型和電流;在CD頁(yè)面設(shè)定并開(kāi)啟檢測(cè)器溫度。電化學(xué)檢測(cè)器:在ED頁(yè)面打開(kāi)池子電壓,選擇CVMODE為INTAMP并選定波形(WAVEFORM)。
?。?)系統(tǒng)平衡
(8)編輯運(yùn)行樣品表(SEQUENCE)
?。?)系統(tǒng)平衡好后,停止采集基線,啟動(dòng)樣品表,選擇要運(yùn)行的樣品表。
?。?0)做完樣后雙擊打開(kāi)第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn),點(diǎn)擊QNT-EDITER,進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。
?。?1)關(guān)機(jī)。